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如何培养EL4细胞
发布时间:2020-02-10 05:25

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  2016-12-20展开全部EL4细胞培养时,所有操作阶段都需要在严格控制的环境中进行,湿度、温度、PH值、氧气浓度和气压等等都必须严格把关。

  用新配制的三蒸水配制,高糖DMEM干粉(规格10×1L),溶入约总量的1/3的三蒸水,并用水洗净包装袋,在磁力搅拌器上搅拌30分钟,加入NaHCO2 3.75克,补加水至最终量。用1N HCL调整PH为7.2,0.22μm滤膜抽滤除菌,分装-20℃保存,使用时加10%的胎牛血清及双抗溶液(最终浓度:青霉素100U/ml,链霉素 100μg/ml)

  使用前56℃水浴30分钟灭活,无菌条件下分装成10ml包装,-20℃保存。用时以10%浓度注入培养液中。

  青霉素100万单位及硫酸链霉素1g无菌条件下溶于消毒三蒸水10ml,分装,-20℃保存。使用时每1000ml培养液加入青、链霉素混合液1ml,最终浓度为青霉素100单位/ml,链霉素100μg/ml。